بررسی تنوع ژنتیکی شته خالدار یونجه therioaphis trifolii در مناطق مختلفی از ایران

شته خالدار یونجه با نام علمی therioaphis trifolii buckten از جمله آفات مهم یونجه میباشد. بمنظور بررسی تنوع ژنتیکی این شته، نمونه برداری از مزارع یونجه 10 استان کشور صورت گرفت. نمونه ها تا رسیدن به آزمایشگاه درون ازت مایع قرار گرفتند و سپس به فریزر c?80- منتقل شدند. استخراج dna از نمونه های جمع آوری شده به روش دلاپورتا با اندکی تغییرات توسط کوماتسودا انجام و غلظت dnaهای به دست آمده بوسیله دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری و غلظت همه نمونه ها بمیزان 50 نانوگرم بر میکرولیتر یکسان شد. آزمون pcr بر روی این dnaها صورت گرفت. سپس الکترفورز بر روی ژل آگارز 1% انجام گرفت. در آزمون rapd-pcr از 7 آغازگر تصادفی استفاده شد. در مجموع این آغازگرها در محدودهbp 4000-200، 88باند دیده شد. سپس با استفاده از باندهای بدست آمده از تمامی آغازگرها، بوسیله روش upgma درخت فیلوژنی نمونه ها رسم گردید که شامل سه کلاستر بوده که کلاستر دوم خود شامل دو ساب کلاستر است. در آزمون rep-pcr از آغازگرهای box، eric و rep استفاده شد. در مجموع در محدوده bp 3500-100، 53 باند دیده شد. سپس درخت فیلوژنی مرکب از داده های سه آغازگر با روش ذکر شده رسم گردید که شامل یک کلاستر کلی بود و نمونه های منطقه خبر به صورت یک فرد مشاهده شد. در این پژوهش بین نمونه های جمع آوری شده از مناطق مختلف از نظر ژنتیکی تفاوت وجود داشت اما ارتباطی بین این تفاوت و اختلاف ارتفاع از سطح دریا و طول و عرض جغرافیایی و موقعیت قرار گرفتن اراضی مشاهده نگردید.